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菌種培養(yǎng)及打管說明

 準(zhǔn)備工作

一、制定培養(yǎng)方案

當(dāng)我們準(zhǔn)備培養(yǎng)一個菌株之前,首先要了解這個菌株的生長特性,確定該菌株的營養(yǎng)需求、生長溫度、氣體環(huán)境、滲透壓、酸堿度及嗜鹽性等條件,選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)環(huán)境,制定活化培養(yǎng)方案。通常購買的菌株都附帶說明書,按照說明書推薦的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件來準(zhǔn)備。若沒有說明書,可通過查閱文獻(xiàn)(推薦查看伯杰細(xì)菌手冊或常見細(xì)菌鑒定手冊)等方式確認(rèn)菌株的生長條件,再制定方案。

二、菌株處理

獲得菌株后,原則上應(yīng)盡早進(jìn)行活化和保存。若不能立即活化,應(yīng)按照說明書放入相應(yīng)的環(huán)境中進(jìn)行保存。若菌株為厭氧菌,請按厭氧菌培養(yǎng)要求在厭氧環(huán)境中操作。

(1)若保存的菌株為凍干粉形式,可加入少量生理鹽水或非選擇性肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行溶解懸浮,用劃線或涂布方式接種至平板,或著吸取菌液至液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。

(2)若保存的菌株為甘油凍存或液體保存形式,可在室溫速融后劃線或涂布接種至平板,或直接加入到液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。

(4)若保存的菌株為斜面或半固體形式,可直接挑取菌苔轉(zhuǎn)接至平板或液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。

三、活化菌株使用的培養(yǎng)基的成分通常包括以下幾個組分

(1)基本營養(yǎng)成分,如蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉等,主要提供碳源、氮源及微量元素等;

(2)氯化鈉:維持一定的滲透壓環(huán)境;

(3)磷酸鹽:維持pH的相對穩(wěn)定;

(4)特殊成分:如血清、半胱氨酸、氯化血紅素等,促進(jìn)特定菌的生長。

根據(jù)菌株的生長特性,選擇合適的培養(yǎng)基或?qū)μ囟ǖ呐囵B(yǎng)基添加成分進(jìn)行改良,以滿足菌株的生長需求

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