一、產(chǎn)品簡介
1. 產(chǎn)品名稱:人軟骨細(xì)胞
2. 組織來源:軟骨組織
3. 產(chǎn)品規(guī)格:如 105cells廳25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4. 細(xì)胞簡介:
人軟骨細(xì)胞分離自軟骨組織;軟骨組織由軟骨細(xì)胞、基質(zhì)及纖維構(gòu)成。軟骨組織再生能力強(qiáng),這些增生的幼稚細(xì)胞形似纖維母細(xì)胞,以后逐漸變?yōu)檐浌悄讣?xì)胞,并形成軟骨基質(zhì),細(xì)胞被埋在軟骨陷窩內(nèi)而變?yōu)殪o止的軟骨細(xì)胞。根據(jù)軟骨組織內(nèi)所含纖維成分的不同, 可將軟骨分為透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨三種,其中以透明軟骨的分布較廣,結(jié)構(gòu)也較典型。軟骨細(xì)胞(chondrocyte)位于軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的軟骨細(xì)胞位于軟骨組織的表層, 單個(gè)分布, 體積較小, 呈橢圓形, 長軸與軟骨表面平行, 越向深層的軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形, 細(xì)胞核圓形或卵圓形, 染色淺, 細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性, 常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于軟骨陷窩內(nèi), 這些軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成, 稱為同源細(xì)胞群。電鏡下, 軟骨細(xì)胞有突起和皺福, 細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中, 軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形, 在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
本公司生產(chǎn)的軟骨細(xì)胞采用膠原酶·中性蛋白酶聯(lián)合消化制備而,來細(xì)胞總量約為5×105 cells/瓶: 細(xì)胞經(jīng)II型膠原蛋白免疫熒光鑒定, 純度可達(dá)90%以上, 且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
5. 培養(yǎng)基信息:
DMEM-Fl2, FBS、軟骨細(xì)胞生長添加劑、Vitamin Supplements、Penicillin、
Streptomycin等
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,人軟骨細(xì)胞可傳5代左右,隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的 增加,細(xì)胞將漸漸失去軟骨細(xì)胞的特征, 3代以內(nèi)細(xì)胞狀態(tài)最佳 :建議您收到細(xì)胞后盡
快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后, 請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用 75% 酒精消毒瓶身, 拆下封口膜, 放入37℃、5%C0 2、 飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn) 定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用 PBS 清洗細(xì)胞一次:
2) 添加0.25%腆蛋白酶消化液約l mL至培養(yǎng)瓶中, 37 ℃ 溫浴3min左右: 倒置顯微鏡下觀察, 待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液, 再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻, 按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代, 然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL, 置于37℃、5%C0 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng):
4) 待細(xì)胞完全貼壁后, 培養(yǎng)觀察: 之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請(qǐng)注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中, 膜酶消化時(shí)間不直過長,否 則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片, 記錄細(xì)胞狀態(tài), 便于和技術(shù)部溝通:由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)
和我們聯(lián)系, 詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以 使我們的技術(shù)人員跟蹤、回出直至問題得到解決。
5. 該細(xì)胞只可用于科研。
備注: 由于實(shí)驗(yàn)所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同, 以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考