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人甲狀腺癌組織源性原代細(xì)胞
人甲狀腺癌組織源性原代細(xì)胞
規(guī)格:
貨期:
編號:MZ-4275
品牌:Mingzhoubio

活化細(xì)胞
凍存細(xì)胞
熒光標(biāo)記細(xì)胞

規(guī)格:
T25瓶
凍存管

產(chǎn)品名稱 人甲狀腺癌組織源性原代細(xì)胞
商品貨號 MZ-4275
組織來源 中國成年病人手術(shù)后的甲狀腺癌組織。
細(xì)胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。
細(xì)胞傳代步驟 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞復(fù)蘇步驟 將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞凍存步驟 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
主要病生理變化 1、乳頭狀腺癌是甲狀腺癌中最常見的類型,約占70%。大小不一。一般分化良好,惡性程 度低。癌組織脆軟易碎,色暗紅;但老年患者的乳頭壯癌一般較堅硬而蒼白。乳頭狀癌的中 心常有囊性變,囊內(nèi)充滿血性液。有時癌組織可發(fā)生鈣化,切面呈砂粒樣。上述囊性變和鈣 化與癌腫的惡性程度與預(yù)后無關(guān)。顯微鏡下見到癌瘤由柱狀上皮乳頭狀突起組成,有時可混 有濾泡樣結(jié)構(gòu),甚至發(fā)現(xiàn)乳頭狀向濾泡樣變異的情況。乳頭狀腺癌葉有完整的包膜,到后期 同樣可以穿破包膜而侵及周圍組織,播用途徑主要是淋巴道,一般以頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移最為常見, 約在80%的兒童和2%的成年患者可捫及淋巴結(jié),其次是血液轉(zhuǎn)移到肺或骨。 2、濾泡狀腺癌較乳頭狀腺癌少見,約占甲狀腺癌的20%,居第二位,其患者的平均年齡較 乳頭狀癌者大。癌腫柔軟,具彈性,或橡皮樣,呈圓形、橢圓形或分葉結(jié)節(jié)形。切面呈紅褐 色,可見纖維化、鈣化、出血及壞死灶。分化良好的濾泡狀腺癌在鏡下可見與正常甲狀腺相 似的組織結(jié)構(gòu),但有包膜、血管和淋巴管受侵襲的現(xiàn)象;分化差的濾泡狀腺癌則見不規(guī)則結(jié) 構(gòu),細(xì)胞密集成團(tuán)狀或條索狀,很少形成濾泡。播散途徑雖可經(jīng)淋巴轉(zhuǎn)移,但主要是通過血 液轉(zhuǎn)移到肺、骨和肝。有些濾泡狀腺癌可在手術(shù)切除后相隔很長時間才見復(fù)發(fā),但其預(yù)后不 及乳頭狀腺癌好。 3、甲狀腺髓樣癌占甲狀腺癌的2~5%。此病由Hazard 于1959 年首先描述,具有分泌甲狀 腺降鈣素以及伴發(fā)嗜鉻細(xì)胞瘤和甲狀腺腺增生(Ⅱ型多發(fā)性內(nèi)分泌腫瘤,MENⅡ)的特點(diǎn)。 髓樣癌源自甲狀腺胚胎的鰓后體,從濾泡旁明亮細(xì)胞(C 細(xì)胞)轉(zhuǎn)變而來。濾泡旁細(xì)胞是來 源于神經(jīng)嵴的內(nèi)分泌細(xì)胞,這些內(nèi)分泌細(xì)胞具有一種共同的功能,即能攝取5 羥色胺和多巴 胺等前體,並經(jīng)其中的脫羧酶予以脫羧,所以也稱為胺前體攝取脫羧細(xì)胞。腫瘤多為單發(fā)結(jié) 節(jié),偶有多發(fā),質(zhì)硬而固定,有淀粉樣沉積,很少攝取放射性碘。癌細(xì)胞形態(tài)主要由多邊形 和梭形細(xì)胞組成,排列多樣化。4、甲狀腺未分化癌占甲狀腺癌的5%,主要發(fā)生于中年以上患者,男性多見。腫塊質(zhì)硬而 不規(guī)則,固定,生長迅速,很快彌漫累及甲狀腺,一般在短期內(nèi)就可浸潤氣管、肌肉、神經(jīng) 和血管,引起吞咽和呼吸困難。腫瘤局部可有觸痛。顯微鏡下見癌組織主要由分化不良的上 皮細(xì)胞組成,細(xì)胞呈多形性,常見核分裂相。頸部可出現(xiàn)淋巴結(jié)腫大,也有肺轉(zhuǎn)移。該病預(yù) 后差,對放射性碘治療無效,外照射僅控制局部癥狀。
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